产品货号:
BTN100303
中文名称:
柱式真菌DNA提取试剂盒(玻璃珠法)
英文名称:
Fungus DNA Column extraction kit(Glass bead method)
产品规格:
50次
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
真菌DNA提取是一个难题,一是因为真菌有菌丝体、孢子等多种完全不同的结构形态,二是因为其细胞壁一般都很厚,比较难以破碎。本产品是液氮研磨法柱式真菌DNA提取试剂盒的姊妹产品,它利用玻璃珠法破碎细胞,主要用于从真菌孢子和液体培养的真菌细胞中提取DNA(液氮研磨法柱式真菌DNA提取试剂盒采用液氮研磨法破碎细胞,适用于从真菌菌丝体中提取其基因组DNA)。
产品特点:
1.即开即用,提供包括玻璃珠、离心吸附柱在内的所有试剂和耗材。
2.采用玻璃珠法破碎细胞,属于物理方法,远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好,也不容易带入外援真菌DNA。
3.本方法提取一个样品只需要10余分钟,方便、快速和高效。
4.一次可以处理5mL的过夜真菌培养物,所得的基因组DNA OD260/OD280一般都在1.8左右,长度一般在20kb左右,每mL菌液的DNA产率一般在1~3μg。可以直接用于PCR和酶切等后续试验。
试剂盒组成:
储存条件:常温运输及保存,保存期为一年。
使用方法:
1.对菌液:取3~5mL过夜培养的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干净的塑料离心管中,12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
2.对菌落:用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落(约50mg),转移到装有1mL水的干净的塑料离心管中,洗涤下接种环上的菌体。12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
3.对孢子材料,一般取0.1g左右,直接加入到离心管中,然后进入下一步操作。
4.在材料中加入无菌水1mL,振荡半分钟后12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
5.沉淀中加入500μL溶液A和0.5克的玻璃珠,涡旋震荡10分钟。
6.加入500μL的溶液B,涡旋震荡3分钟,12000rpm离心2分钟,将上清液全部转移到一个5mL的干净的塑料离心管中。或者每管0.3mL,分别转移到2~3个1.5mL的干净的塑料离心管中。
7.在上清中加入3倍体积的溶液C,颠倒数次混匀后,分三次上离心吸附柱,每次上柱后均先室温放置2分钟,然后12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液,再第二次上柱,重复上面的操作,直到挂柱步骤完成。
8.在离心吸附柱中加入500μL通用洗柱液,12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液。
9.重复上步操作一次。
10.12000rpm空柱离心1分钟。
11.加入50~100μL DNA洗脱液2.0,室温放置1分钟以上,12000rpm离心1分钟,穿透液即为真菌DNA样品。
12.为了得到更多的DNA样品,可以重复上步操作1~2次。
13.所得DNA即可立即使用或放冰箱长期保存。
相关搜索:柱式真菌DNA提取试剂盒(玻璃珠法)
产品特点:
1.即开即用,提供包括玻璃珠、离心吸附柱在内的所有试剂和耗材。
2.采用玻璃珠法破碎细胞,属于物理方法,远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好,也不容易带入外援真菌DNA。
3.本方法提取一个样品只需要10余分钟,方便、快速和高效。
4.一次可以处理5mL的过夜真菌培养物,所得的基因组DNA OD260/OD280一般都在1.8左右,长度一般在20kb左右,每mL菌液的DNA产率一般在1~3μg。可以直接用于PCR和酶切等后续试验。
试剂盒组成:
成成分 | 规格 |
溶液A | 25mL |
溶液B | 25mL |
溶液C | 75mL |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50mL |
DNA洗脱液2.0 | 10mL |
酸洗玻璃珠,400μm | 25g |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,保存期为一年。
使用方法:
1.对菌液:取3~5mL过夜培养的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干净的塑料离心管中,12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
2.对菌落:用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落(约50mg),转移到装有1mL水的干净的塑料离心管中,洗涤下接种环上的菌体。12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
3.对孢子材料,一般取0.1g左右,直接加入到离心管中,然后进入下一步操作。
4.在材料中加入无菌水1mL,振荡半分钟后12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
5.沉淀中加入500μL溶液A和0.5克的玻璃珠,涡旋震荡10分钟。
6.加入500μL的溶液B,涡旋震荡3分钟,12000rpm离心2分钟,将上清液全部转移到一个5mL的干净的塑料离心管中。或者每管0.3mL,分别转移到2~3个1.5mL的干净的塑料离心管中。
7.在上清中加入3倍体积的溶液C,颠倒数次混匀后,分三次上离心吸附柱,每次上柱后均先室温放置2分钟,然后12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液,再第二次上柱,重复上面的操作,直到挂柱步骤完成。
8.在离心吸附柱中加入500μL通用洗柱液,12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液。
9.重复上步操作一次。
10.12000rpm空柱离心1分钟。
11.加入50~100μL DNA洗脱液2.0,室温放置1分钟以上,12000rpm离心1分钟,穿透液即为真菌DNA样品。
12.为了得到更多的DNA样品,可以重复上步操作1~2次。
13.所得DNA即可立即使用或放冰箱长期保存。
相关搜索:柱式真菌DNA提取试剂盒(玻璃珠法)